Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Prostein Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406577-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ProsteinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Prostein (h) e o Plasmídeo Double Nickase Prostein (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC45A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Prostein Anticorpo (A-5): sc-393069
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Prostein Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Prostein Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC45A3 codifica a prostein, uma proteína de membrana multipasse enriquecida na próstata que se localiza predominantemente no aparelho de Golgi e contribui para processos epiteliais de secreção e tráfego intracelular. A sua expressão é regulada pela sinalização do recetor de androgénios e é frequentemente utilizada como marcador molecular de linhagem prostática e do estado de diferenciação. Padrões alterados de expressão de SLC45A3 e rearranjos génicos recorrentes envolvendo o locus SLC45A3 têm sido descritos na biologia do cancro da próstata, sustentando a sua utilidade no estudo de programas de transcrição responsivos a androgénios. A perturbação funcional da prostein oferece uma via viável para investigar o tráfego de membranas, a homeostase do Golgi e redes regulatórias associadas à linhagem em sistemas modelo humanos derivados da próstata.
Prostein O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC45A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC45A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC45A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC45A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.