PRIC285 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406441

Descripción general

HELZ2 codifica PRIC285, un supuesto factor tipo helicasa implicado en la regulación de la transcripción mediante la coactivación de receptores nucleares y el metabolismo del ARN asociado a la cromatina. PRIC285 se ha vinculado a programas génicos metabólicos gobernados por PPAR y vías relacionadas, conectándolo con la homeostasis de lípidos, la función mitocondrial y la señalización inflamatoria. Se ha informado de actividad alterada de HELZ2 en contextos de desregulación metabólica y remodelación transcripcional asociada a tumores, lo que lo hace relevante para estudios de redes reguladoras génicas y transiciones de estado celular. Sus funciones nucleares sitúan a HELZ2 como un nodo útil para diseccionar el “crosstalk” entre transcripción, procesamiento de ARN y programas de respuesta al estrés en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRIC285 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HELZ2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HELZ2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HELZ2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRIC285.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HELZ2 para la investigación de la señalización de PRIC285, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HELZ2 críticos para la función de PRIC285
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HELZ2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRIC285 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRIC285 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HELZ2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRIC285 (h) y el plásmido HDR PRIC285 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HELZ2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HELZ2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.