PRIC285 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406441

Panoramica

HELZ2 codifica PRIC285, un presunto fattore di tipo elicasi implicato nella regolazione della trascrizione attraverso la coattivazione dei recettori nucleari e il metabolismo dell’RNA associato alla cromatina. PRIC285 è stato collegato a programmi genici metabolici governati da PPAR e da vie correlate, mettendolo in relazione con l’omeostasi lipidica, la funzione mitocondriale e la segnalazione infiammatoria. Alterazioni dell’attività di HELZ2 sono state riportate in contesti di disregolazione metabolica e di rimodellamento trascrizionale associato ai tumori, rendendolo rilevante per lo studio delle reti di regolazione genica e delle transizioni di stato cellulare. Le sue funzioni nucleari fanno di HELZ2 un nodo utile per analizzare il crosstalk tra trascrizione, processamento dell’RNA e programmi responsivi allo stress nelle cellule umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PRIC285 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene HELZ2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del HELZ2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto HELZ2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PRIC285.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di HELZ2 per lo studio della segnalazione di PRIC285, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni HELZ2 critici per la funzione di PRIC285
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di HELZ2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PRIC285 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PRIC285 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus HELZ2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PRIC285 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PRIC285 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia HELZ2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio HELZ2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.