Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422382
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP2A-Cβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP2A-Cβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PP2A-Cα/β Anticorpo (1D6): sc-80665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422382 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppp2cb codifica a subunidade catalítica Cβ da proteína fosfatase 2A (PP2A), uma importante fosfatase de serina/treonina que contrabalança a sinalização por quinases ao desfosforilar diversos substratos no citoplasma e no núcleo. Holoenzimas contendo PP2A-Cβ regulam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA, a apoptose e o controle metabólico por meio de vias que incluem PI3K–AKT, MAPK/ERK e a sinalização Wnt/β-catenina. Em sistemas murinos, a perturbação da atividade de PP2A influencia a homeostase de fosforilação e pode remodelar redes de sinalização frequentemente implicadas na transformação oncogênica e em disfunções neurobiológicas. Assim, Ppp2cb serve como um nó útil para dissecar o controle dependente de fosfatases sobre crescimento, adaptação ao estresse e sinalização neuronal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP2A-Cβ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppp2cb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppp2cb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppp2cb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP2A-Cβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppp2cb para a investigação da sinalização de PP2A-Cβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppp2cb críticos para a função PP2A-Cβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppp2cb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PP2A-Cβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppp2cb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP2A-Cβ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PP2A-Cβ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppp2cb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppp2cb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.