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Pax-6慢病毒激活颗粒(m) | sc-422119-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Pax6 编码配对盒转录因子 Pax-6,它是眼、前脑以及胰腺内分泌发育的主调控因子,负责调控谱系命运决定、祖细胞维持和神经元分化。Pax-6 通过结合启动子和增强子元件,协调发育形态发生因子信号下游的转录程序,并在组织模式形成过程中调节依赖染色质的基因调控。在成年阶段,Pax-6 参与神经可塑性与内分泌基因表达,将其剂量效应与调控细胞命运转换及分化状态稳定性的通路联系起来。PAX6 活性失调与先天性眼部畸形和神经发育相关表型有关,因此它是研究发育期基因调控网络及疾病相关转录调控的重要关键节点。
Pax-6 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Pax6 表达。
Pax-6 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Pax6转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Pax-6表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Pax6 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。