palladin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-428317-KO-2

Descripción general

Mouse **Palld** codifica la **palladina**, una proteína de andamiaje asociada a la actina que coordina la organización del citoesqueleto al unirse a reguladores de la actina y entrecruzar componentes en las fibras de estrés, las adhesiones focales y otros complejos de adhesión. La palladina contribuye al control de la forma celular, la maduración de las adhesiones y la migración dirigida, integrando señales de las GTPasas de la familia Rho y de vías que gobiernan la contractilidad actomiosínica y las interacciones con la matriz extracelular. La alteración en la expresión o la localización de la palladina se ha asociado con un remodelado tisular anómalo y fenotipos invasivos en contextos relevantes para el cáncer, lo que convierte a **Palld** en un nodo útil para estudiar la desregulación del citoesqueleto. En el sistema murino, la perturbación de **Palld** se utiliza comúnmente para analizar mecanismos de motilidad, mecanotransducción y señalización dependiente de adhesión en modelos de desarrollo y enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO palladin (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Palld en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Palld junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Palld tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína palladin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Palld para la investigación de la señalización de palladin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Palld críticos para la función de palladin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Palld para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido palladin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido palladin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Palld. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR palladin (m) y el plásmido HDR palladin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Palld para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Palld definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.