PAF acetylhydrolase 2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-410924-LAC

PAFAH2 kodiert den Plättchenaktivierenden-Faktor-Acetylhydrolase 2 (PAF-AH2), eine intrazelluläre Phospholipase, die die sn-2-Acetylgruppe des plättchenaktivierenden Faktors (PAF) sowie verwandter oxidierter Phospholipide hydrolysiert und dadurch die Verfügbarkeit von Lipidmediatoren und die Homöostase der Membranlipide moduliert. Durch die Begrenzung bioaktiver, PAF-ähnlicher Spezies beeinflusst PAFAH2 inflammatorische Signalwege, Reaktionen auf oxidativen Stress und nachgeschaltete Prozesse wie Zytokinproduktion, Apoptose und zelluläre Stressanpassung. Eine veränderte Verarbeitung oxidierter Phospholipide und eine veränderte PAF-Signalgebung wurden mit entzündlichen Phänotypen und Kontexten von Gewebeschädigung in Verbindung gebracht, wodurch PAFAH2 einen hilfreichen Ansatzpunkt zur Untersuchung lipidgetriebener Signalgebung und redoxregulierter Signalwege darstellt. Die experimentelle Modulation von PAFAH2 unterstützt mechanistische Arbeiten in der Immunologie, der Gefäßbiologie und in Modellen metabolischen Stresses, in denen der Phospholipid-Umsatz die Zellfunktion beeinflusst.

PAF acetylhydrolase 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PAFAH2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PAF acetylhydrolase 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PAFAH2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PAF acetylhydrolase 2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PAFAH2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.