p68 RNA Helicase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402401

Visão geral

DDX5 codifica a helicase de RNA p68, uma helicase de RNA ATP-dependente da família DEAD-box que remodela RNA e complexos ribonucleoproteicos para controlar o splicing do pré-mRNA, a biogênese de ribossomos e o processamento de microRNAs. A p68 também atua como co-regulador transcricional ao interagir com fatores de transcrição responsivos a sinais, conectando o metabolismo de RNA a programas de expressão gênica que governam a progressão do ciclo celular e respostas ao estresse. Por meio dessas atividades, a DDX5 contribui para a manutenção da integridade do genoma e para a coordenação das respostas a danos no DNA com o processamento de RNA. A expressão ou função desregulada de DDX5 tem sido associada a redes transcricionais oncogênicas e a paisagens alteradas de splicing de RNA em múltiplos contextos tumorais, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos de fenótipos de doença impulsionados por RNA.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p68 RNA Helicase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDX5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDX5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDX5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p68 RNA Helicase.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDX5 para a investigação da sinalização de p68 RNA Helicase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDX5 críticos para a função p68 RNA Helicase
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDX5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo p68 RNA Helicase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo p68 RNA Helicase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDX5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo p68 RNA Helicase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR p68 RNA Helicase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDX5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDX5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.