p35 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400431

개요

CDK5R1은 신경세포에 풍부한 조절 서브유닛인 p35를 암호화하며, p35는 사이클린 의존성 키나아제 5(CDK5)에 결합해 이를 활성화함으로써 막 및 신경돌기 내에서 키나아제 활성이 시공간적으로 조절되도록 한다. CDK5–p35 복합체는 세포골격 및 신호전달 단백질의 인산화를 통해 신경세포 이동, 축삭 유도, 시냅스 형성, 활동 의존적 시냅스 가소성을 조정하며, 미세소관과 액틴 역학을 조절하는 경로와 연결된다. p35의 분해 조절이 깨지고 p25로 전환되면 CDK5 활성이 장시간 지속되어 단백질 항상성(proteostasis)을 교란할 수 있으며, 이는 신경퇴행 및 흥분독성 스트레스에서 연구되는 기전에 기여한다. 또한 CDK5R1 발현 변화 또는 CDK5–p35 신호전달의 변화는 간질, 신경발달 관련 표현형, 신경 손상 반응과 같은 맥락에서도 연구되어 왔다.

p35 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CDK5R1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CDK5R1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CDK5R1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 p35 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 p35 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CDK5R1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• p35 기능에 중요한 CDK5R1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CDK5R1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• p35 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 p35 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CDK5R1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  p35 HDR 플라스미드 (h) 및 p35 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CDK5R1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CDK5R1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.