Plasmide CRISPR/Cas9 KO OMG (h): sc-406746

Présentation

OMG (ostéoglycine) code un petit protéoglycane sécrété riche en leucines, qui participe à l’organisation de la matrice extracellulaire et à la fibrillogenèse du collagène, influençant la biomécanique tissulaire et la signalisation cellule–matrice. En modulant l’architecture matricielle, OMG peut affecter des voies liées aux intégrines ainsi que la disponibilité des facteurs de croissance, qui orientent les programmes d’adhésion, de migration et de différenciation cellulaires. Des altérations du remodelage de la matrice extracellulaire impliquant OMG ont été étudiées dans des contextes tels que la fibrose, le remodelage cardiovasculaire et la biologie du microenvironnement tumoral, où la composition du stroma peut influencer des phénotypes associés aux maladies. Ces caractéristiques font d’OMG une cible utile pour étudier comment les composants de la matrice régulent le comportement cellulaire et la communication intercellulaire dans des systèmes humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO OMG (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène OMG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du OMG, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert OMG à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine OMG.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en OMG pour l'étude de la signalisation de OMG, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de OMG essentiels à la fonction de OMG
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de OMG pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le OMG plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le OMG plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus OMG. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le OMG plasmide HDR (h) et le OMG (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie OMG pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles OMG définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.