OATP-F CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405736

Übersicht

SLCO1C1 kodiert das humane organische Anionentransport-Polypeptid OATP‑F (OATP1C1), einen Solutträger in der Plasmamembran, der die natriumunabhängige Aufnahme von Schilddrüsenhormonen und verwandten Iodthyroninen vermittelt, mit hoher Affinität zu Thyroxin (T4) und reversem Trijodthyronin (rT3). Dieser Transporter spielt eine wichtige Rolle bei der Kontrolle der Hormonverfügbarkeit an Gewebebarrieren, einschließlich der Blut‑Hirn‑Schranke, und beeinflusst damit die lokale Homöostase von Schilddrüsenhormonen sowie nachgeschaltete Transkriptionsprogramme, die durch Schilddrüsenhormonrezeptoren reguliert werden. Durch die Steuerung des intrazellulären Iodthyroninflusses steht OATP‑F an der Schnittstelle von endokriner Signalübertragung, metabolischer Regulation und xenobiotischen Verarbeitungswegen, die von einem kontrollierten, transporter-vermittelten Substratzugang abhängen. Veränderte Transporteraktivität oder -expression ist für die Forschung zur neuroendokrinen Regulation und zu Erkrankungen relevant, die mit einer gestörten Verteilung und Signalgebung von Schilddrüsenhormonen zusammenhängen.

Das OATP-F CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLCO1C1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLCO1C1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLCO1C1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die OATP-F-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLCO1C1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der OATP-F-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLCO1C1-Exone abzielen, die für die OATP-F-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLCO1C1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom OATP-F CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom OATP-F CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLCO1C1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das OATP-F HDR-Plasmid (h) und OATP-F HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLCO1C1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLCO1C1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.