Nup88 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422392

Descripción general

Nup88 (nucleoporina de 88 kDa) es un componente esencial del complejo del poro nuclear que contribuye al transporte nucleo-citoplasmático y a la organización general de la envoltura nuclear. Al asociarse con otras nucleoporinas y receptores de transporte, Nup88 ayuda a regular el tráfico de proteínas y ARN que controlan programas transcripcionales, la progresión del ciclo celular y la señalización sensible al estrés. Las alteraciones en la abundancia o la localización de Nup88 se han relacionado con defectos en la fidelidad del transporte nuclear y en el mantenimiento del genoma, procesos que con frecuencia se ven perturbados en contextos proliferativos y del neurodesarrollo. Por ello, Nup88 de ratón se utiliza ampliamente para investigar la regulación de la señalización y la expresión génica dependiente del poro nuclear en la fisiología normal y en estados celulares relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nup88 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nup88 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nup88 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nup88 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nup88.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nup88 para la investigación de la señalización de Nup88, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nup88 críticos para la función de Nup88
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nup88 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nup88 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Nup88 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nup88. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nup88 (m) y el plásmido HDR Nup88 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nup88 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nup88 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.