NRF-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421961

Übersicht

Das Mausgen **Nrf1 (NRF-1)** kodiert einen Transkriptionsfaktor, der die nukleäre Kontrolle der mitochondrialen Biogenese und der respiratorischen Funktion koordiniert, indem er Gene reguliert, die an der oxidativen Phosphorylierung, der Transkriptions-/Replikationsmaschinerie der mitochondrialen DNA sowie am zellulären Energiestoffwechsel beteiligt sind. **NRF-1** verknüpft Nährstoff- und Wachstumsfaktorsignale mit dem Fortschreiten des Zellzyklus und der Redoxhomöostase, unterstützt die Proteostase und adaptive Antworten auf metabolischen Stress. Eine Dysregulation von **NRF-1**-abhängigen Transkriptionsprogrammen wurde in experimentellen Modellen mit veränderter mitochondrialer Funktion und Phänotypen oxidativen Stresses in Verbindung gebracht, die für Neurodegeneration, kardiometabolische Dysfunktion und die krebsassoziierte metabolische Umprogrammierung relevant sind. Als zentraler Knotenpunkt im mitochondrial-nukleären Crosstalk wird **NRF-1** häufig in Signalwegen untersucht, die die Bioenergetik, den Umgang mit ROS und Transkriptionsnetzwerke steuern, welche Differenzierung und Stressresilienz prägen.

Das NRF-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Nrf1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Nrf1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Nrf1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NRF-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Nrf1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NRF-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Nrf1-Exone abzielen, die für die NRF-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Nrf1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NRF-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom NRF-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Nrf1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NRF-1 HDR-Plasmid (m) und NRF-1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Nrf1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Nrf1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.