Plásmido Doble Nickase (m) NLRC5: sc-436677-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)NLRC5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NLRC5 (m) y el plásmido de doble nickasa NLRC5 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Nlrc5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NLRC5 Anticuerpo (B-10): sc-515668
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) NLRC5 | sc-436677-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) NLRC5 | sc-436677-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nlrc5 codifica NLRC5, un sensor citosólico de la familia NLR que actúa como un regulador transcripcional clave de la presentación de antígenos por MHC de clase I, al promover la expresión de H2-K/H2-D, la β2-microglobulina y componentes del procesamiento de antígenos. NLRC5 se integra en redes de señalización inmunitaria innata aguas abajo de las vías del interferón y puede modular programas transcripcionales inflamatorios, conectando la detección de patógenos con el cebado de la respuesta inmunitaria adaptativa. En sistemas murinos, la actividad alterada de Nlrc5 se ha asociado con cambios en la vigilancia inmunitaria, la susceptibilidad a infecciones y la regulación de las interacciones entre tumores y el sistema inmunitario. Estas características hacen de NLRC5 un nodo útil para analizar la dinámica de la presentación de antígenos, los mecanismos de evasión inmunitaria y la expresión génica inducida por interferón en modelos celulares relevantes.
NLRC5 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Nlrc5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Nlrc5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Nlrc5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Nlrc5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.