NICE4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411379

Visão geral

UBAP2L (NICE4) codifica uma proteína associada à ubiquitina e ligadora de RNA, que se localiza em grânulos citoplasmáticos de ribonucleoproteínas e contribui para o controle pós-transcricional da expressão gênica. Ela tem sido implicada na montagem de grânulos de estresse e no metabolismo de RNA, apoiando a adaptação celular ao estresse proteotóxico e oxidativo, ao mesmo tempo em que influencia programas de proliferação e sobrevivência. Por meio dessas funções, a UBAP2L se conecta a vias que governam a tradução e a estabilidade do mRNA, e sua desregulação tem sido relatada em estudos sobre crescimento associado ao câncer e fenótipos metastáticos. A dissecação da função de NICE4 pode ajudar a esclarecer como a dinâmica de grânulos de RNA e a sinalização relacionada à ubiquitina coordenam transições de estado celular relevantes para a biologia de doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NICE4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UBAP2L em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UBAP2L, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UBAP2L na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NICE4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UBAP2L para a investigação da sinalização de NICE4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UBAP2L críticos para a função NICE4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UBAP2L para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NICE4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NICE4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UBAP2L. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NICE4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NICE4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UBAP2L para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UBAP2L definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.