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NDR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-402716 | 20 µg | $397.00 |
STK38 codifica la chinasi serina/treonina NDR1, una chinasi della famiglia AGC che agisce a valle di MST1/2 nella segnalazione correlata a Hippo per regolare la progressione del ciclo cellulare, la biologia del centrosoma, l’apoptosi e l’organizzazione del citoscheletro. L’attività di NDR1 è controllata dalla fosforilazione e dal legame con cofattori (incluse le proteine MOB), collegando segnali a monte legati a stress e polarità a output trascrizionali e strutturali. Grazie ai suoi ruoli nel controllo mitotico, nelle risposte associate al danno al DNA e nell’omeostasi epiteliale, STK38/NDR1 è stato studiato in contesti rilevanti per la biologia tumorale, la neurobiologia e la segnalazione legata all’infiammazione. L’alterazione delle vie dipendenti da NDR1 può influenzare fenotipi di proliferazione, sopravvivenza e migrazione comunemente analizzati in modelli meccanicistici di malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NDR1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene STK38 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del STK38 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto STK38 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NDR1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di STK38 per lo studio della segnalazione di NDR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
CRISPR +/- HDR
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.