Nap-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437379

Visão geral

Nap-22 (também conhecida como BASP1) é uma proteína enriquecida em neurônios, associada à membrana, implicada na regulação do crescimento axonal, da extensão de neuritos e da função sináptica por meio de interações com fosfolipídios e complexos de sinalização na membrana plasmática. Ela participa da plasticidade neuronal dependente de atividade e tem sido relacionada à organização do citoesqueleto e a processos de tráfego vesicular que moldam a dinâmica do cone de crescimento. Nap-22 também tem sido estudada no contexto da regulação transcricional por meio de interações nucleares, conectando sinais extracelulares a programas de expressão gênica relevantes para a diferenciação neuronal. Alterações na expressão ou na localização de Nap-22 têm sido associadas a áreas de pesquisa em neurodesenvolvimento e neurodegeneração nas quais a sinalização de membrana e o remodelamento sináptico estão comprometidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nap-22 (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nap-22.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de Nap-22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função Nap-22
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nap-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo Nap-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nap-22 Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR Nap-22 (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.