Myozenin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406184

Visão geral

MYOZ3 codifica a miozenina 3, uma proteína associada ao disco Z que contribui para a organização sarcomérica ao conectar componentes estruturais a complexos de sinalização no músculo estriado. Membros da família das miozeninas interagem com a α-actinina e com moduladores da sinalização calcineurina–NFAT, implicando o MYOZ3 em vias que acoplam a carga mecânica à remodelação transcricional e à manutenção das fibras musculares. A desregulação da arquitetura do disco Z e da sinalização dependente de calcineurina é relevante para estudos de integridade miofibrilar, contratilidade e respostas adaptativas ao estresse no músculo esquelético e cardíaco. Assim, o MYOZ3 é um alvo útil para dissecar a comunicação entre citoesqueleto e transdução de sinais na biologia muscular e em sistemas-modelo de doenças relacionadas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myozenin 3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYOZ3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYOZ3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYOZ3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myozenin 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYOZ3 para a investigação da sinalização de Myozenin 3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYOZ3 críticos para a função Myozenin 3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYOZ3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Myozenin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Myozenin 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYOZ3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Myozenin 3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Myozenin 3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYOZ3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYOZ3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.