Myosin XVIIIBCRISPR激活质粒(h): sc-410206-ACT

人类 MYO18B 基因编码肌球蛋白 XVIIIB（myosin XVIIIB），这是一种非典型的、与肌动蛋白相关的马达蛋白，参与组织细胞骨架结构，并协调细胞黏附、迁移以及细胞内结构组织等依赖肌动蛋白的过程。MYO18B 通过与肌动蛋白网络和支架复合体相互作用，促进机械力传导并维持细胞形态，将细胞骨架动力学与调控组织结构的更广泛信号程序连接起来。多项肿瘤生物学与肌肉相关表型研究报道了 MYO18B 表达异常或细胞骨架调控受扰的现象；在这些情境中，肌动蛋白-肌球蛋白组织的改变可影响侵袭能力、收缩性与分化。因此，MYO18B 常被用于研究调控细胞运动、细胞骨架重塑以及癌相关细胞行为改变的通路。

Myosin XVIIIB CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MYO18B的表达。

Myosin XVIIIB CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的MYO18B基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于MYO18B转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Myosin XVIIIB表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的MYO18B位点，并能够研究内源性位点上依赖于Myosin XVIIIB的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MYO18B表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Myosin XVIIIB通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。