Mts1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401774

Descripción general

S100A4 codifica Mts1, una proteína de la familia S100 que se une a Ca2+ y actúa como regulador de la dinámica del citoesqueleto, la motilidad celular y la señalización intercelular. Mts1 interactúa con dianas como la miosina II no muscular y componentes de la remodelación de actina para influir en el recambio de adhesiones, la migración y las respuestas a la matriz extracelular. Se expresa en múltiples tipos celulares, incluidos fibroblastos y poblaciones inmunitarias, y a menudo se utiliza como marcador de programas estromales activados. La expresión desregulada de S100A4 se ha vinculado con la remodelación inflamatoria y con fenotipos de invasión/metástasis asociados a tumores, lo que lo hace relevante para estudios de fibrosis tisular, tráfico de células inmunitarias y diseminación de células cancerosas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mts1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen S100A4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del S100A4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de S100A4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mts1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en S100A4 para la investigación de la señalización de Mts1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de S100A4 críticos para la función de Mts1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de S100A4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mts1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Mts1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus S100A4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mts1 (h) y el plásmido HDR Mts1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología S100A4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana S100A4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.