MPP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420007

概要

Mpp3は、細胞膜で多タンパク質複合体の形成を組織化する足場（スキャフォールド）タンパク質であるMAGUKファミリーの一員、膜パルミトイル化タンパク質3（MPP3）をコードします。MPP3はPDZ、SH3、グアニル酸キナーゼ様（GK様）ドメインを介して、膜貫通型パートナーを細胞骨格およびシグナル伝達成分と連結し、細胞極性や接着結合部位の構造形成に寄与します。マウス組織では、MPP3は上皮の組織化や、小胞／膜トラフィッキング（輸送）過程に関与し、それらを通じて分化やバリア機能に影響を与えることが示唆されています。MAGUK足場タンパク質の制御異常は、接着依存的シグナルの変化や組織構造の破綻と広く関連しているため、Mpp3は発生や疾患に伴う細胞構築の変化に関わる機構を研究するうえで有用な標的となります。

MPP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMpp3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mpp3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mpp3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MPP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MPP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mpp3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MPP3の機能に不可欠なMpp3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mpp3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MPP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMPP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mpp3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MPP3 HDRプラスミド（m）および MPP3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMpp3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMpp3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。