MLL2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401659-LAC

KMT2D (MLL2) kodiert eine Histon-Lysin-Methyltransferase mit SET-Domäne, die vorwiegend die Mono- und Dimethylierung von H3K4 an Enhancern katalysiert und dadurch die Chromatinzugänglichkeit sowie Transkriptionsprogramme formt. Über Interaktionen mit COMPASS-ähnlichen Komplexen und linienspezifischen Transkriptionsfaktoren trägt MLL2 zur Aktivierung von Enhancern, zur Festlegung von Zellschicksalen und zur koordinierten Regulation entwicklungs- und immunbezogener Signalwege bei. Eine Fehlregulation der KMT2D-assoziierten epigenetischen Kontrolle wurde in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderter Differenzierung und erhöhter Transkriptionsvariabilität in Verbindung gebracht und macht KMT2D zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung chromatinbasierter Genregulation. In der biomedizinischen Forschung wird KMT2D häufig analysiert, um Enhancer-Landschaften mit nachgeschalteten Signalnetzwerken und Zellzustandsübergängen zu verknüpfen.

MLL2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KMT2D-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MLL2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KMT2D-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MLL2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KMT2D-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.