MCAT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404338

개요

MCAT(말로닐-CoA:ACP 트랜스아실레이스)은 말로닐기를 아실 운반 단백질(ACP)로 전달하여 미토콘드리아 지방산 합성(mtFAS)에 필요한 미토콘드리아 효소로, 리포산 생산에 사용되는 아실 사슬의 신장을 가능하게 합니다. 리포산을 생성하는 역할을 통해 MCAT은 피루브산 탈수소효소(PDH)와 α-케토글루타르산 탈수소효소와 같은 핵심 탈수소효소 복합체의 리포일화(lipoylation)를 지원하며, 그 결과 mtFAS를 중심 탄소 대사, 산화환원 항상성, 그리고 미토콘드리아 에너지 흐름과 연결합니다. MCAT 활성의 교란은 미토콘드리아 호흡과 대사체 이용에 영향을 줄 수 있고, 그 하위 효과로 산화 스트레스와 대사 재프로그래밍에도 변화를 유발할 수 있습니다. 이러한 과정은 미토콘드리아 기능장애 및 대사 연관 질환 생물학의 기전 연구와 관련이 있으며, 특히 리포일화 상태와 TCA 회로 연계 효소 기능이 변화하는 맥락에서 중요합니다.

MCAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MCAT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MCAT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MCAT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MCAT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MCAT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MCAT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MCAT 기능에 중요한 MCAT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MCAT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MCAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MCAT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MCAT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MCAT HDR 플라스미드 (h) 및 MCAT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MCAT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MCAT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.