Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MAVS Double Nickase Plasmid (h): sc-400769-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MAVS Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MAVS Double-Nickase-Plasmid (h) und MAVS Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MAVS abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MAVS: sc-166583
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MAVS Double Nickase Plasmid (h) | sc-400769-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAVS Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400769-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAVS (mitochondrial antiviral-signaling protein) ist ein mit den Mitochondrien assoziiertes Adapterprotein, das die zytosolische Erkennung viraler RNA durch RIG-I (DDX58) und MDA5 (IFIH1) mit nachgeschalteten Signalwegen der angeborenen Immunantwort verknüpft. Nach Aktivierung initiiert MAVS die Bildung von Signalkomplexen, die eine TBK1/IKKε-abhängige Aktivierung von IRF3/IRF7 sowie die kanonische, durch IKK vermittelte NF-κB-Signalisierung antreiben und dadurch Typ-I-Interferone und proinflammatorische Zytokine induzieren. Die MAVS-Aktivität wird durch mitochondriale Dynamik und posttranslationale Modifikationen reguliert und integriert zelluläre Stressantworten mit der antiviralen Abwehr. Eine fehlregulierte MAVS-Signalisierung wurde mit veränderter Anfälligkeit für Virusinfektionen und entzündlichen Phänotypen in Verbindung gebracht, die für die Infektionsbiologie und Mechanismen immunvermittelter Erkrankungen relevant sind.
MAVS Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MAVS-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MAVS abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MAVS-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MAVS-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.