Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
MAO-A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401030
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MAO-A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MAO-A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MAO-A Anticuerpo (G-10): sc-271123
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MAO-A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401030 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El MAOA humano codifica la monoamino oxidasa A (MAO-A) de la membrana externa mitocondrial, una enzima dependiente de flavina que cataliza la desaminación oxidativa de aminas biógenas, incluidas la serotonina, la norepinefrina y la dopamina. Mediante la regulación del catabolismo de monoaminas, la MAO-A influye en la homeostasis de los neurotransmisores, el equilibrio redox mitocondrial y redes de señalización posteriores vinculadas a respuestas celulares al estrés. La actividad de la MAO-A contribuye a vías que afectan la producción de especies reactivas de oxígeno y el metabolismo de aldehídos, conectando el recambio de monoaminas con el estrés oxidativo y la adaptación metabólica. La alteración de la expresión o la función de MAOA se ha asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y trastornos que implican una señalización monoaminérgica desregulada, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudios mecanísticos en sistemas celulares neuronales y periféricos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MAO-A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAOA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAOA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAOA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MAO-A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAOA para la investigación de la señalización de MAO-A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MAOA críticos para la función de MAO-A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAOA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MAO-A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MAO-A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAOA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MAO-A (h) y el plásmido HDR MAO-A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAOA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAOA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.