MAGE-C2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405516

Descripción general

MAGEC2 codifica el antígeno asociado a melanoma C2 (MAGE-C2), un antígeno cáncer‑testículo con expresión restringida en tejidos normales de la línea germinal y reexpresión frecuente en tumores diversos. MAGE-C2 participa en la homeostasis proteica al intervenir en procesos dependientes de ubiquitina, incluida la modulación de la actividad de ligasas E3 mediante interacciones con socios que contienen dominio RING, influyendo así en la estabilidad de reguladores de señalización y del ciclo celular. La expresión desregulada de MAGE-C2 se ha vinculado con alteraciones de la proliferación, respuestas al estrés y programas transcripcionales asociados con la progresión maligna y el reconocimiento inmunitario. Como antígeno asociado a tumor, se estudia ampliamente en contextos de presentación de antígenos y como correlato molecular del fenotipo tumoral y de la reorganización de vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MAGE-C2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAGEC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAGEC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAGEC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MAGE-C2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAGEC2 para la investigación de la señalización de MAGE-C2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MAGEC2 críticos para la función de MAGE-C2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAGEC2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAGEC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MAGE-C2 (h) y el plásmido HDR MAGE-C2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAGEC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAGEC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.