LTRPC7 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402820-LAC

TRPM7 (LTRPC7) kodiert einen einzigartigen Kanal‑Kinase‑Komplex, der zweiwertige Kationen – insbesondere Mg²⁺ und Ca²⁺ – leitet und dabei den Ionenfluss an eine zytosolische Serin/Threonin‑Kinasedomäne koppelt. Durch die Regulation der intrazellulären Magnesiumhomöostase, der Zytoskelettdynamik und Ca²⁺‑abhängiger Signalwege beeinflusst TRPM7 Prozesse wie Zellproliferation, Migration, Mechanotransduktion und zelluläre Stressantworten. Die TRPM7‑Aktivität ist mit Signalwegen verknüpft, die mit Membranerregbarkeit und kinasevermittelten Signalnetzwerken zusammenhängen und entzündliche Signalgebung sowie metabolische Anpassung prägen. Eine fehlregulierte TRPM7‑Expression oder ‑Funktion wurde mit neurologischen Schädigungen und Neurodegeneration, kardiovaskulärem Remodeling sowie verändertem Wachstumsverhalten in verschiedenen Krebszusammenhängen in Verbindung gebracht, was TRPM7 zu einem relevanten Knotenpunkt für pathway‑zentrierte funktionelle Genomikstudien macht.

LTRPC7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TRPM7-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

LTRPC7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TRPM7-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen LTRPC7-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TRPM7-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.