Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) LTβR: sc-421483-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LTβR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LTβR Double Nickase (m) et le plasmide LTβR Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ltbr. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LTβR Antibody (H-2): sc-398929
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LTβR | sc-421483-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur de la lymphotoxine bêta (LTβR), codé chez la souris par le gène *Ltbr*, est un membre de la superfamille des récepteurs du TNF qui régule le développement des organes lymphoïdes et l’organisation du microenvironnement immunitaire. La signalisation via LTβR mobilise les voies NF-κB canonique et non canonique pour contrôler l’activation des cellules stromales, l’expression de chimiokines et le maintien de l’architecture des tissus lymphoïdes. Par ces processus, il influence le trafic des leucocytes, les niches de cellules présentatrices d’antigènes et le dialogue entre les compartiments stromal et immunitaire. Une activité altérée de LTβR a été associée à des phénotypes inflammatoires et auto-immuns et contribue à des mécanismes pertinents pour l’inflammation chronique et les interactions tumeur–système immunitaire.
LTβR Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ltbr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ltbr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ltbr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ltbr.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.