Partículas Lentivirales de Activación (h) LRP130: sc-402029-LAC

LRPPRC codifica LRP130, una proteína de unión a ARN asociada a las mitocondrias que coordina la regulación posranscripcional de la expresión génica del orgánulo al estabilizar y procesar los ARNm mitocondriales, y al promover su poliadenilación y traducción. A través de estas actividades, LRP130 contribuye a la biogénesis de los complejos de fosforilación oxidativa, al funcionamiento del ribosoma mitocondrial y, de forma más amplia, al control del metabolismo energético celular. Las vías dependientes de LRPPRC se entrecruzan con la comunicación mitonuclear, la remodelación adaptativa de la respiración frente al estrés y el metabolismo del ARN dentro de las mitocondrias. Las alteraciones en la función de LRPPRC se han vinculado a fenotipos de disfunción mitocondrial y a contextos de enfermedades neurometabólicas, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudios de bioenergética y regulación de genes mitocondriales.

Las partículas de activación lentiviral LRP130 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de LRPPRC en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral LRP130 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción LRPPRC, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de LRP130. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo LRPPRC y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.