Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LPP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406769
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LPP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LPP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LPP Anticuerpo (8B3A11): sc-101434
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LPP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406769 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LPP (lipoma‑preferred partner) codifica una proteína adaptadora que contiene dominios LIM y que se localiza en las adhesiones focales y en las uniones célula‑célula, donde acopla la tensión del citoesqueleto a respuestas transcripcionales. Mediante interacciones con proteínas asociadas a actina y con nodos de señalización, LPP contribuye a la dinámica de adhesión vinculada a integrinas, la mecanotransducción y la regulación de programas de migración e invasión celular. También se ha implicado en el transporte núcleo‑citoplasmático y en la modulación de la expresión génica aguas abajo de vías dependientes de la adhesión. Se han descrito alteraciones en la expresión o reordenamientos de LPP en contextos que incluyen tumores mesenquimales y progresión metastásica, lo que respalda su utilidad como diana para estudiar fenotipos oncogénicos regulados por la adhesión.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LPP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LPP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LPP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LPP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LPP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LPP para la investigación de la señalización de LPP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LPP críticos para la función de LPP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LPP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LPP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LPP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LPP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LPP (h) y el plásmido HDR LPP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LPP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LPP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.