leupaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430706

Visão geral

O gene **Lpxn** de camundongo codifica a **leupaxina**, um adaptador de adesão focal contendo domínio LIM que se associa a complexos ligados a integrinas e a proteínas reguladoras de actina para coordenar a remodelação do citoesqueleto. A leupaxina participa de vias de sinalização dependentes de adesão envolvendo a quinase de adesão focal (**FAK**) e quinases da família **Src**, influenciando o espalhamento celular, a migração e a mecanotransdução. Em contextos imunes e mesenquimais, pode modular programas transcricionais por meio de interações com receptores nucleares e outros co-reguladores. A desregulação da sinalização de adesões focais e a alteração da expressão de leupaxina têm sido associadas a comportamento celular invasivo e à dinâmica do microambiente inflamatório, reforçando sua relevância em estudos de biologia do câncer e do tráfego de células imunes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO leupaxin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lpxn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lpxn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lpxn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína leupaxin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lpxn para a investigação da sinalização de leupaxin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lpxn críticos para a função leupaxin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lpxn para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo leupaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo leupaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lpxn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo leupaxin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR leupaxin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lpxn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lpxn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.