LEO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407864

Visão geral

LEO1 codifica um componente central do complexo humano PAF1, que se associa à RNA polimerase II para coordenar o alongamento da transcrição, a liberação da pausa próxima ao promotor e o processamento co-transcricional de RNA. Por meio de interações com fatores de alongamento e associados à cromatina, LEO1 contribui para a dinâmica de modificações de histonas e para a regulação de programas de expressão gênica que controlam proliferação e diferenciação. Alterações na atividade do complexo PAF1, incluindo perturbações em LEO1, têm sido associadas à desregulação transcricional e à instabilidade genômica observadas em múltiplos contextos de câncer. Como resultado, LEO1 é frequentemente estudado em vias que governam o controle do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a regulação epigenética da transcrição.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LEO1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LEO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LEO1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LEO1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LEO1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LEO1 para a investigação da sinalização de LEO1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LEO1 críticos para a função LEO1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LEO1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LEO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LEO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LEO1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LEO1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LEO1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LEO1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LEO1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.