Lamin B2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401873

Descripción general

LMNB2 codifica la lámina B2, una proteína esencial de filamentos intermedios de tipo V de la lámina nuclear que sostiene la arquitectura de la envoltura nuclear y la organización de la cromatina. La lámina B2 contribuye a la replicación del ADN, la regulación transcripcional y el reensamblaje nuclear durante la mitosis, integrando funciones estructurales y reguladoras en la mecánica nuclear y la estabilidad del genoma. Como parte de la red más amplia de láminas, influye en procesos como el posicionamiento de los poros nucleares y el anclaje de los dominios asociados a la lámina (LAD), que modelan el estado epigenético y la diferenciación celular. La desregulación de los componentes de la lámina nuclear, incluido LMNB2, se vincula con una morfología nuclear alterada y se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y proliferativos relevantes para la mecanobiología y la investigación sobre el mantenimiento del genoma.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Lamin B2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LMNB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LMNB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LMNB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Lamin B2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LMNB2 para la investigación de la señalización de Lamin B2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LMNB2 críticos para la función de Lamin B2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LMNB2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Lamin B2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Lamin B2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LMNB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Lamin B2 (h) y el plásmido HDR Lamin B2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LMNB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LMNB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.