Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO KLK7 (h): sc-403539
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- KLK7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique KLK7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KLK7 Antibody (H-5): sc-514447
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KLK7 (h) | sc-403539 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
KLK7 code la peptidase 7 apparentée aux kallikréines, une protéase à sérine sécrétée qui contribue à l’homéostasie épidermique en traitant des composants de la couche cornée et en modulant la desquamation. KLK7 participe à des cascades protéolytiques extracellulaires et peut influencer la fonction barrière, l’adhésion cellule–cellule et la signalisation inflammatoire via le clivage régulé de substrats protéiques dans le microenvironnement cutané. Une expression ou une activité dérégulée de KLK7 a été associée à l’inflammation cutanée et à des défauts de barrière, et fait fréquemment l’objet d’études dans des contextes de malignité épithéliale, où la protéolyse péricellulaire peut affecter des phénotypes liés à l’invasion. Ainsi, KLK7 est couramment étudiée dans des voies reliant l’activité protéasique à la différenciation, aux réseaux de cytokines et au remodelage de la matrice extracellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO KLK7 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KLK7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KLK7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KLK7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine KLK7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KLK7 pour l'étude de la signalisation de KLK7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de KLK7 essentiels à la fonction de KLK7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KLK7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le KLK7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le KLK7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KLK7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le KLK7 plasmide HDR (h) et le KLK7 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KLK7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KLK7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.