KANSL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406711

Descripción general

KANSL1 codifica un componente central del complejo acetiltransferasa de histonas NSL (nonspecific lethal), que coopera con KAT8/MOF para acetilar la histona H4 (en particular H4K16ac) y regular la accesibilidad de la cromatina. Mediante esta actividad epigenética, KANSL1 influye en programas transcripcionales vinculados a la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la expresión de genes del neurodesarrollo. La alteración de KANSL1 se asocia fuertemente con el síndrome de Koolen–de Vries y se ha implicado en fenotipos del neurodesarrollo más amplios, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de la regulación mediada por cromatina. Sus conexiones funcionales con la remodelación de la cromatina y el control transcripcional respaldan investigaciones sobre cómo los estados alterados de acetilación de histonas afectan la diferenciación neuronal y la estabilidad de las redes génicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KANSL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KANSL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KANSL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KANSL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KANSL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KANSL1 para la investigación de la señalización de KANSL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KANSL1 críticos para la función de KANSL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KANSL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KANSL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KANSL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KANSL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KANSL1 (h) y el plásmido HDR KANSL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KANSL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KANSL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.