Plásmido Doble Nickase (h) KAI 1: sc-401317-NIC

CD82 (KAI1) es una glicoproteína de superficie celular de la familia de las tetraspaninas que organiza microdominios de membrana y regula la adhesión, la motilidad y la señalización de receptores dependientes de integrinas. Al modular las interacciones entre tetraspaninas, integrinas y receptores de factores de crecimiento, KAI1 influye en la remodelación del citoesqueleto, la endocitosis y las vías downstream vinculadas a la migración y la supervivencia celulares. Las alteraciones en la expresión o la localización de CD82 se estudian con frecuencia en el contexto de la progresión tumoral, la invasión y la diseminación metastásica, así como del tráfico de células inmunitarias y la señalización inflamatoria. Estas características hacen de CD82 una diana útil para analizar la arquitectura de la señalización en membrana, la dinámica de adhesión y el crosstalk entre vías en modelos celulares humanos.

KAI 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CD82 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CD82. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CD82. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CD82 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.