JDP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406888

Panoramica

JDP2 (Jun dimerization protein 2) è un fattore di trascrizione con dominio basic leucine zipper (bZIP) che modula l’espressione genica dipendente da AP-1 formando eterodimeri con membri della famiglia JUN/FOS e influenzando la struttura della cromatina tramite interazioni con complessi che modificano gli istoni. Agisce come regolatore dipendente dal contesto di programmi cellulari quali differenziamento, controllo del ciclo cellulare, risposte allo stress e apoptosi, con ruoli descritti nella segnalazione dello stress ossidativo e nelle reti trascrizionali dell’infiammazione. Modellando gli output trascrizionali a valle delle MAPK e di altre vie sensibili agli stimoli, JDP2 contribuisce all’impegno di linea e alle risposte adattative ai segnali ambientali. Un’espressione o un’attività deregolate di JDP2 sono state associate a fenotipi alterati di proliferazione e sopravvivenza rilevanti per la biologia del cancro e per processi immuno-correlati, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici sulla regolazione trascrizionale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO JDP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene JDP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del JDP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto JDP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina JDP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di JDP2 per lo studio della segnalazione di JDP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni JDP2 critici per la funzione di JDP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di JDP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal JDP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal JDP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus JDP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal JDP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR JDP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia JDP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio JDP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.