IRAK-2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404304-NIC

Il gene umano **IRAK2** codifica la chinasi 2 associata al recettore dell’interleuchina-1 (**IRAK-2**), un membro della famiglia delle chinasi serina/treonina che funge da intermediario chiave della segnalazione a valle dei recettori Toll-like e del recettore per l’IL-1. IRAK-2 partecipa a complessi di segnalazione dipendenti da MyD88, contribuendo all’attivazione delle vie **NF-κB** e **MAPK** e modellando programmi trascrizionali che regolano le citochine infiammatorie e le risposte immunitarie innate. Attraverso il suo ruolo nella segnalazione dei recettori con dominio TIR, IRAK-2 influenza l’attivazione delle cellule immunitarie, la segnalazione di risposta ai patogeni e il crosstalk con vie legate allo stress e all’apoptosi. Una segnalazione associata a IRAK2 deregolata è stata collegata a stati infiammatori anomali e ad alterazioni della segnalazione immunitaria osservate in molteplici contesti patologici, supportandone l’impiego come bersaglio meccanicistico in studi focalizzati sulle vie di segnalazione.

IRAK-2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IRAK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IRAK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IRAK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IRAK2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.