IL-27Rα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405846

Panoramica

IL27RA codifica la subunità alfa del recettore dell’IL-27 (IL-27Rα, nota anche come WSX-1/TCCR), una subunità recettoriale per citochine che forma un complesso di segnalazione con gp130 per mediare le risposte all’IL-27. Il legame di IL-27Rα attiva le vie JAK/STAT, in particolare STAT1 e STAT3, influenzando la differenziazione dei linfociti T, limitando l’infiammazione eccessiva e modulando la funzione delle cellule presentanti l’antigene. La segnalazione dipendente da IL27RA influenza l’equilibrio Th1/Th17, le reti regolatorie e i programmi genici responsivi all’interferone che si intersecano con il dialogo tra immunità innata e adattativa. La disregolazione di questo asse è stata associata a patologie immuno-mediate e a un’alterata difesa dell’ospite, rendendo IL27RA un bersaglio utile per studi meccanicistici in modelli di malattie infiammatorie e infettive.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-27Rα (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL27RA in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL27RA insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL27RA a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-27Rα.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL27RA per lo studio della segnalazione di IL-27Rα, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IL27RA critici per la funzione di IL-27Rα
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL27RA per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL27RA. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-27Rα Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-27Rα (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL27RA per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL27RA definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.