IL-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403228

概要

ヒトIL22は、インターロイキン22（IL-22）をコードする遺伝子であり、主としてTh17/Th22細胞および自然リンパ球（ILC）によって産生されるサイトカインである。IL-22は、上皮および間質系細胞に発現するIL-22R1/IL-10R2受容体複合体を介してシグナルを伝達する。IL-22はJAK1/TYK2依存的なSTAT3シグナルを活性化し、さらにMAPKやPI3K経路とも交差しながら、粘膜表面におけるバリア機能の維持、抗菌ペプチド発現、粘液産生、組織修復プログラムを調節する。IL-22活性の制御異常は、皮膚・肺・消化管組織に影響する病態において、免疫細胞と上皮を結び付ける炎症回路に関与することが示唆されており、文脈に応じて腫瘍関連炎症や上皮増殖を調節し得る。これらの特性により、IL22は免疫―上皮クロストーク、バリア生物学、ならびにサイトカイン駆動性の転写応答を解析するうえで有用な標的となる。

IL-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIL22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IL22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IL22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IL22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-22の機能に不可欠なIL22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IL22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IL22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-22 HDRプラスミド（h）および IL-22 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIL22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIL22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。