IL-16 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421091

Panoramica

Il16 del topo codifica IL-16, una citochina immunoregolatoria prodotta come precursore pro-IL-16 e successivamente processata per generare un mediatore bioattivo che funge da chemiotattico e modulatore dell’attivazione dei leucociti. La segnalazione di IL-16 influenza il comportamento dei linfociti T e dei fagociti mononucleati modellando le reti citochiniche, le risposte migratorie e la comunicazione cellula–cellula all’interno dei tessuti infiammati. Attraverso questi effetti, IL-16 contribuisce alla regolazione del traffico delle cellule immunitarie e dei programmi di segnalazione infiammatoria rilevanti per l’autoimmunità, l’infiammazione allergica e la disregolazione immunitaria associata alle infezioni. La perturbazione di Il16 è quindi utile per analizzare i meccanismi di polarizzazione immunitaria, reclutamento leucocitario e rimodellamento tissutale legato all’infiammazione nei sistemi di modello murino.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-16 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Il16 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Il16 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Il16 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-16.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Il16 per lo studio della segnalazione di IL-16, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Il16 critici per la funzione di IL-16
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Il16 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IL-16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Il16. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-16 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IL-16 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Il16 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Il16 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.