Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Hhip (m): sc-420853
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Hhip Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Hhip, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Hhip Antibody (5D11): sc-293265
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Hhip (m) | sc-420853 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La Hhip (hedgehog-interacting protein) murine code un antagoniste de la signalisation Hedgehog associé à la membrane, qui se lie aux ligands Hedgehog et limite l’activation de la voie. En modulant la disponibilité des ligands, Hhip contribue au contrôle de la mise en place des patrons de développement, de l’homéostasie tissulaire et des interactions épithélio-mésenchymateuses en aval des programmes transcriptionnels Sonic Hedgehog–GLI. Une expression ou une régulation altérée de Hhip a été associée à une dérégulation de la sortie de la voie Hedgehog, impliquée dans des malformations congénitales et divers états physiopathologiques, notamment une croissance aberrante et un remodelage fibrotique. En tant que frein de la voie, Hhip est fréquemment étudiée dans des contextes où la signalisation Hedgehog influence les décisions de destin cellulaire, la prolifération et la différenciation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Hhip (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Hhip dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Hhip, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Hhip à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Hhip.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Hhip pour l'étude de la signalisation de Hhip, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Hhip essentiels à la fonction de Hhip
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Hhip pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Hhip plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Hhip plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Hhip. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Hhip plasmide HDR (m) et le Hhip (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Hhip pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Hhip définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.