Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) HB-EGF: sc-420827-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)HB-EGF consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HB-EGF (m) y el plásmido de doble nickasa HB-EGF (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Hbegf. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HB-EGF Anticuerpo (H-1): sc-365182
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) HB-EGF | sc-420827-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Hbegf de ratón codifica el factor de crecimiento similar al EGF con afinidad por heparina (HB‑EGF), un ligando de EGFR/ERBB anclado a la membrana que se libera mediante escisión proteolítica para generar un mitógeno soluble. La señalización de HB‑EGF activa vías canónicas de receptores tirosina cinasa, incluidas MAPK/ERK y PI3K/AKT, modulando programas de proliferación, supervivencia, migración y respuesta a heridas en células epiteliales y del estroma. A través de la liberación regulada de su ectodominio y de la señalización autocrina/paracrina, HB‑EGF contribuye a la remodelación tisular y a transiciones del estado celular, como una motilidad de tipo mesenquimal. La actividad desregulada del eje HB‑EGF–EGFR se estudia con frecuencia en contextos de hiperproliferación, remodelación asociada a la inflamación y redes de señalización oncogénicas.
HB-EGF El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hbegf en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hbegf. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hbegf. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hbegf alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.