Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405778
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HAP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HAP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HAP1 Anticuerpo (C-3): sc-166245
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405778 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HAP1 (proteína 1 asociada a huntingtina) es una proteína citoplasmática de andamiaje, enriquecida en neuronas, que se une a la huntingtina y coordina complejos de tráfico y de señalización. Contribuye al transporte basado en microtúbulos, a la clasificación endosomal y a la dinámica de vesículas, influyendo en el reciclaje de receptores y en el crecimiento de neuritas. HAP1 también interactúa con reguladores del citoesqueleto y con proteínas motoras para modular la distribución intracelular de orgánulos y carga. Las alteraciones en las vías de transporte y proteostasis vinculadas a HAP1 se estudian con frecuencia en el contexto de mecanismos neurodegenerativos, incluidos los fenotipos de estrés celular asociados a la enfermedad de Huntington.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HAP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HAP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HAP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HAP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HAP1 para la investigación de la señalización de HAP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HAP1 críticos para la función de HAP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HAP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HAP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HAP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HAP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HAP1 (h) y el plásmido HDR HAP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HAP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HAP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.