Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HAI-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404011
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HAI-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HAI-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HAI-1 Anticorpo (H-1): sc-137159
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HAI-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404011 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SPINT1 codifica o inibidor tipo 1 do ativador do fator de crescimento de hepatócitos (HAI-1), um inibidor de proteases serina do tipo Kunitz ancorado à membrana que restringe a proteólise pericelular nas superfícies epiteliais. O HAI-1 regula a atividade e a maturação de proteases como a matriptase (ST14) e a hepsina, moldando assim a remodelação da matriz extracelular, a integridade da barreira epitelial e cascatas de sinalização de fatores de crescimento, incluindo HGF/c-MET. Por meio dessas interações, SPINT1 contribui para a homeostase epitelial, a reparação de feridas e o controle de programas relacionados à motilidade celular e à invasão. O desequilíbrio na regulação de SPINT1/HAI-1 tem sido associado a alterações em redes de proteases observadas em patologias epiteliais, incluindo lesão inflamatória e remodelação associada ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HAI-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SPINT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SPINT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SPINT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HAI-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SPINT1 para a investigação da sinalização de HAI-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SPINT1 críticos para a função HAI-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SPINT1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HAI-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HAI-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SPINT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HAI-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HAI-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SPINT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SPINT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.