GPR78 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405837

Descripción general

GPR78 codifica un receptor acoplado a proteína G implicado en la transducción de señales a través de la membrana y en la coordinación de las respuestas celulares a estímulos extracelulares. Como GPCR, GPR78 está en posición de modular vías descendentes de segundos mensajeros, incluidas las señales vinculadas a AMPc y al calcio, con efectos potenciales sobre programas de proliferación, supervivencia y motilidad celular. Las alteraciones en la expresión de GPCR o en la dinámica de su señalización se asocian con frecuencia a una desregulación de la homeostasis tisular y a procesos oncogénicos, lo que hace que GPR78 sea relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y en fenotipos de señalización relacionados. La caracterización de la función de GPR78 también respalda esfuerzos de mapeo de vías que conectan la actividad del receptor con adaptaciones transcripcionales y metabólicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR78 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPR78 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPR78 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPR78 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR78.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPR78 para la investigación de la señalización de GPR78, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPR78 críticos para la función de GPR78
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPR78 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR78 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR78 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPR78. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR78 (h) y el plásmido HDR GPR78 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPR78 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPR78 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.