GPR41 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402190

Descripción general

FFAR3 codifica el receptor acoplado a proteína G GPR41, un sensor de superficie celular para ácidos grasos de cadena corta como el acetato, el propionato y el butirato, producidos por la fermentación microbiana. Tras la unión del ligando, GPR41 se acopla principalmente a la señalización Gi/o para reducir el AMPc y modular vías posteriores que influyen en el metabolismo celular, los programas secretorios y el tono inflamatorio de manera dependiente del contexto. La actividad de FFAR3 se ha vinculado a la comunicación huésped–microbioma, la regulación del balance energético y redes de señalización neuroendocrinas e inmunitarias. La señalización alterada de FFAR3/GPR41 se estudia en la biología de enfermedades metabólicas e inflamatorias, donde puede afectar la adiposidad, la sensibilidad a la insulina y respuestas asociadas a citocinas, sin implicar resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR41 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FFAR3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FFAR3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FFAR3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR41.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FFAR3 para la investigación de la señalización de GPR41, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FFAR3 críticos para la función de GPR41
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FFAR3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR41 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR41 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FFAR3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR41 (h) y el plásmido HDR GPR41 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FFAR3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FFAR3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.