GPI CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402796

개요

글루코스-6-인산 이성질화효소(GPI)는 글루코스-6-인산과 프럭토스-6-인산 사이의 가역적 상호전환을 촉매하는 다기능 효소로, 해당과정과 당신생합성을 연결하는 핵심 단계에 관여합니다. 이들 경로를 통한 탄소 흐름을 조절함으로써 GPI는 세포의 ATP 생성, 생합성 전구체의 가용성, 그리고 산화환원 균형에 영향을 미치며, 그 결과 스트레스 조건에서의 대사 적응을 형성합니다. 세포질에서의 대사적 역할을 넘어, GPI는 세포외 신호전달 환경에서도 기능하는 것으로 보고되어 왔으며, 대사와 세포 이동성 및 미세환경 상호작용을 연결합니다. GPI의 활성 또는 발현 변화는 대사 조절 이상과 연관되며, 유전성 효소 결핍으로 인한 빈혈 및 증식성 질환 모델에서 관찰되는 대사 재편성 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔습니다.

GPI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GPI 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GPI 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GPI의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GPI 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GPI 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GPI 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GPI 기능에 중요한 GPI 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GPI 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GPI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GPI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GPI 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GPI HDR 플라스미드 (h) 및 GPI HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GPI 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GPI 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.