Ggnbp2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432161

Visão geral

Ggnbp2 (proteína 2 de ligação à gametogenetina) é uma proteína associada a células germinativas implicada na biologia reprodutiva masculina, com enriquecimento relatado em tecidos testiculares e ligações a processos relacionados à espermatogênese. Embora seus parceiros moleculares ainda não estejam completamente definidos, a Ggnbp2 tem sido associada à regulação de programas de transcrição e de estados de diferenciação celular na linhagem germinativa. A perturbação de genes ativos nesse contexto pode influenciar a organização da cromatina, a progressão meiótica e o desenvolvimento dos espermatozoides, tornando a Ggnbp2 de interesse para o estudo de vias subjacentes à fertilidade e à homeostase das células germinativas. Padrões de expressão alterados de reguladores enriquecidos no testículo, como a Ggnbp2, também são examinados no contexto de controle aberrante do ciclo celular e de diferenciação desregulada em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ggnbp2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ggnbp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ggnbp2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ggnbp2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ggnbp2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ggnbp2 para a investigação da sinalização de Ggnbp2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ggnbp2 críticos para a função Ggnbp2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ggnbp2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ggnbp2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Ggnbp2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ggnbp2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ggnbp2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Ggnbp2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ggnbp2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ggnbp2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.