GFRαL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436523
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GFRαL O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GFRαL, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GFRαL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436523 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Gfral** de camundongo codifica a **GFRαL (GFRAL)**, um co-receptor ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que se liga seletivamente à **GDF15** e sinaliza por meio da tirosina-quinase receptora **RET**. Essa via ativa a sinalização a jusante **MAPK/ERK** e **PI3K/AKT** para regular circuitos neuronais que controlam o equilíbrio energético, o comportamento alimentar e a homeostase metabólica sistêmica. A expressão de **GFRAL** é enriquecida em regiões do tronco encefálico envolvidas no controle do apetite, conectando a sinalização **GDF15–GFRAL–RET** à regulação do peso corporal e a respostas do tipo anorexia associadas ao estresse em modelos pré-clínicos. Consequentemente, **Gfral** é amplamente estudado em sinalização neurometabólica, biologia relacionada à caquexia e mecanismos que ligam sinais inflamatórios à regulação central do metabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GFRαL (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gfral em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gfral, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gfral na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GFRαL.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gfral para a investigação da sinalização de GFRαL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gfral críticos para a função GFRαL
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gfral para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GFRαL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GFRαL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gfral. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GFRαL Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GFRαL (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gfral para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gfral definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.