GBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405870

概要

グアニル酸結合タンパク質4（GBP4）は、I型およびII型インターフェロンシグナル伝達の下流で細胞内在性免疫に関与する、インターフェロン誘導性の大型GTPアーゼである。GBP4は、病原体の制限、炎症性シグナル伝達、抗ウイルス応答を調節する自然免疫のエフェクタープログラムに関与し、JAK–STATによって駆動される転写ネットワークやインターフェロン刺激遺伝子（ISG）経路と機能的に結び付いている。免疫細胞の活性化状態やサイトカイン制御過程に影響を与えることから、GBP4の発現と活性は、感染生物学および免疫関連の病態生理の文脈でしばしば検討される。GTPアーゼ依存的応答の協調における役割により、GBP4は刺激依存的な細胞防御プログラムの再編を研究するための有用な結節点となる。

GBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGBP4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GBP4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GBP4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GBP4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GBP4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GBP4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GBP4の機能に不可欠なGBP4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GBP4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGBP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GBP4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GBP4 HDRプラスミド（h）および GBP4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGBP4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGBP4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。